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    MCC010-1BL-21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

    鼎國

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    一、運(yùn)輸條件
          感受態(tài)細(xì)胞使用干冰運(yùn)輸。請(qǐng)檢查感受態(tài)是否為凍存狀態(tài),若不是請(qǐng)拒絕接收。
    二、儲(chǔ)存條件
          感受態(tài)細(xì)胞必須在干冰運(yùn)輸后立即置于-80℃凍存,不能保存于液氮中。感受態(tài)細(xì)胞對(duì)溫度變化非常敏感,即使是很小的溫度變化(從一個(gè)冰箱到另一個(gè)冰箱的轉(zhuǎn)移)都會(huì)使得其轉(zhuǎn)化效率下降。
    三、產(chǎn)品檢測(cè)
          以100μl的感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化0.1ng/μl pUC19為陽性對(duì)照,以不加質(zhì)粒的作為為陰性對(duì)照,操作過程同下述轉(zhuǎn)化步驟。轉(zhuǎn)化后,以 50μl 的轉(zhuǎn)化物涂板(含有 100μg/ml ampicillin)。37℃培養(yǎng)過夜,計(jì)算轉(zhuǎn)化效率。
    四、BL21(ED3) 菌株介紹
         基因型:F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7nin5])。
         該菌株用于以 T7 RNA 聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的高效外源基因的蛋白表達(dá)宿主。T7 噬菌體RNA 聚合酶基因的表達(dá)受控于 λ 噬菌體 DE3 區(qū)的 lacUV5 啟動(dòng)子,該區(qū)整合于 BL21 的染色體上。該菌適合于非毒性蛋白的表達(dá)。

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